紅細(xì)胞裂解液設(shè)計(jì)用來(lái)優(yōu)化在小鼠的造血組織如脾臟的單細(xì)胞懸液裂解和人外周血中紅細(xì)胞。該產(chǎn)品含有氯化銨,按照指示使用時(shí),能夠裂解紅細(xì)胞,而對(duì)淋巴細(xì)胞只有輕微影響。但有核紅細(xì)胞不能有效地用氯化銨裂解。經(jīng)裂解液裂解得到的組織細(xì)胞中不含紅細(xì)胞。
紅細(xì)胞裂解液直接配制法對(duì)于純凈的物質(zhì)可準(zhǔn)確進(jìn)行稱量,用蒸餾水溶解后,轉(zhuǎn)移到一定容積的容量瓶中稀釋至標(biāo)線,溶液的準(zhǔn)確濃度可以直接計(jì)算出來(lái)。溶質(zhì)的純度、性質(zhì)等對(duì)濃度有較大影響,為此,對(duì)用來(lái)直接配制標(biāo)準(zhǔn)溶液用的基準(zhǔn)物質(zhì)必須具備以下條件:
?。?)物質(zhì)的純度要高,含量不得低于99.9%,雜質(zhì)的含量應(yīng)當(dāng)少到可以忽略的程度。
(2)物質(zhì)的分子組成應(yīng)與其化學(xué)式*符合,包括結(jié)水合物中的結(jié)品水含量也必須與其化學(xué)式相符合。
?。?)性質(zhì)穩(wěn)定,貯蔵時(shí)應(yīng)不發(fā)生變化,不易吸收空氣中的水分、二氧化碳等氣體而改變其成分,不易風(fēng)化潮解和被空氣氧化,烘干時(shí)不易分解等。此外使用分子量較大的基準(zhǔn)物質(zhì)以減小稱量誤差。
紅細(xì)胞裂解液的技術(shù)優(yōu)勢(shì):
1、能有效的處理土壤樣品中一些很難處理的組分如:真細(xì)菌孢子、內(nèi)芽孢、格蘭仕陽(yáng)性菌、酵母、線蟲(chóng)、海藻、真菌等。
2、樣品處理過(guò)程中可在整個(gè)提取過(guò)程中有效的保護(hù)核酸,并更大限度的降低RNA污染。
3、基于硅珠的純化方法,可有效地去除腐植酸、多元酚等PCR抑制物
4、純化所得的DNA可直接用于PCR、酶切等后續(xù)實(shí)驗(yàn)之中。
5、對(duì)腐植酸含量特別高的樣品,附加額外的處理方法。